Refrigeração do sêmen da garoupa-verdadeira Epinephelus marginatus / Refrigerated storage of dusky grouper Epinephelus marginatus sperm

Foram estudados diferentes diluentes no processo de refrigeração do sêmen da garoupa-verdadeira. Inicialmente, a taxa e a duração da motilidade e a concentração espermática foram avaliadas, caracterizando a qualidade do sêmen fresco. Para os testes de refrigeração a 4ºC, diferentes diluentes foram testados em atmosfera normal e modificada (100% oxigênio). O sêmen fresco apresentou concentração espermática de 3,1±0,2 x 109 células mL-1, motilidade média de 90%, permanecendo móvel, em média, por 3.060 segundos. No experimento de refrigeração, a taxa e a duração média da motilidade foram mantidas adequadas durante 144 horas para o diluente A (70%; 3100 segundos) em atmosfera normal. Na atmosfera modificada, a qualidade do sêmen caiu drasticamente durante as primeiras 24 horas, independentemente do diluente empregado, não propiciando vantagem em sua utilização. A refrigeração do sêmen da garoupa-verdadeira permite manter por até 144 horas uma apropriada qualidade espermática.(AU)

This study aimed to evaluate different extenders in refrigerated storage of dusky grouper sperm. Initially, motility rate, motility time, and sperm density were analyzed to characterize the fresh sperm quality. Different diluents were used in the refrigerated storage sperm at 4ºC in normal atmosphere and modified atmosphere (100% oxygen). The fresh sperm has a spermatozoa density of 3.1±0.2 x 109 spermatozoa mL-1, motility rate 90% and motility time of 3,060 seconds. In the experiment of refrigerated storage, the motility rate and the motility time were maintained appropriate for 144 hours for the extender A (70%; 3,100 seconds) in normal atmosphere. In the modified atmosphere, the sperm quality decreased drastically during the first 24 hours, independently of the diluent used, not propitiating advantages. The refrigerated sperm of dusky grouper is a viable alternative for the short-term storage, being possible, to maintain for up to 144 hours an appropriate sperm viability.(AU)

Viabilidade do sêmen de tatus-peba (Euphractus sexcinctus) centrifugado e diluído em Tris ou agua de coco em pó / Viability of the six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus) semen centrifuged and extended in Tris or powdered coconut water

Foram avaliados os efeitos da centrifugação associada ao uso de dois diluentes na manutenção da viabilidade espermática em tatus-peba (Euphractus sexcinctus) ao longo do teste de termorresistência (TTR). Amostras de sêmen (n=12), oriundas de 04 machos adultos coletados por eletroejaculação, foram divididas em quatro alíquotas, sendo duas imediatamente diluídas em Tris ou água de coco em pó (ACP-119(r)), e as outras duas centrifugadas (800g10min-1) previamente à diluição. As amostras foram incubadas a 34°C por 3h, e os parâmetros seminais avaliados em intervalos de 1h. Em termos gerais, verificou-se uma redução da viscosidade espermática imediata à diluição em ambos os diluentes, independente do uso da centrifugação. Aos 60 minutos, verificou-se uma redução dos parâmetros avaliados (P<0,05), embora o Tris tenha promovido uma melhor preservação deles (P<0,05), quando comparado ao ACP-119(r) até os 120 minutos de avaliação. Após este período, os dois diluentes se equipararam (P>0,05). Ainda, verificou-se um efeito deletério da centrifugação sobre a qualidade do sêmen de tatus-peba durante todo o teste de termorresistência. Nas condições do presente estudo, conclui-se que o diluente Tris mostrou-se superior ao ACP-119(r) para a manutenção da viabilidade do sêmen de tatus-peba, sendo desnecessária a realização de centrifugação prévia à diluição.

The effects of the centrifugation associated to the use of two extenders on the viability of six-banded armadillo's (Euphractus sexcinctus) sperm were evaluated during a thermo resistance test (TRT). Semen samples (n=12) derived from 04 stud males collected by electroejaculation were divided in four aliquots; two of that were immediately diluted in Tris or powdered coconut water (ACP-119(r)); the two others were centrifuged (800g10min-1) prior to the dilution. Samples were incubated at 34ºC per 3h, and the semen parameters were evaluated at each hour. In general, dilution promoted a reduction in semen viscosity in the use of both diluents using centrifugation or not. At 60min, a decrease was verified for all semen parameters (P<0.05), however they were better preserved in the use of Tris when compared to ACP-119(r) (P<0.05) up to 120min. After that, both diluents equated. In addition, centrifugation procedure presented a deleterious effect on the armadillo's semen quality during all the thermoresistance test. In the present conditions, conclude that Tris extender is more efficient than ACP-119(r) for the preservation of six-banded armadillo semen viability, and the previous centrifugation is unnecessary.

Criopreservação de sêmen suíno: avanços tecnológicos e perspectivas / Cryopreservation of boar semen: progress and perspectives / Criopreservación de semen de verraco: avances y perspectivas tecnológicas

Resumo A criopreservação de sêmen suíno é uma técnica ainda não consolidada devido à alta sensibilidade do espermatozoide da espécie ao processo de congelamento e descongelamento. Ainda assim, a utilização do sêmen criopreservado é altamente desejável para o intercâmbio genético e manutenção da biossegurança. Esta revisão tem como objetivo ressaltar alguns fatores limitantes do processo e apontar os consideráveis avanços desenvolvidos nos últimos anos, principalmente devido ao aperfeiçoamento das técnicas já existentes, como caracterização das proteínas do ejaculado, ajustes na remoção do plasma seminal e uso de adjuvantes na confecção dos diluentes. Todas estas técnicas tornarão a criopreservação do sêmen suíno mais aplicável nos próximos anos para que possa ser finalmente uma técnica de uso comercial.

Abstract Biotechnology of boar semen cryopreservation has not succeeded due to the high sensitivity of swine sperm to the freezing and thawing process. However, its use is highly desirable for genetic improvement and maintenance of biosecurity. This review aims to highlight some limitations of the process and point out important advances obtained in recent years, including the improvement of existing techniques, such as protein characterization of the ejaculate, adjustments in the removal of seminal plasma, and use of adjuvants in the manufacture of diluents; all of which will make cryopreservation commercially available in the near future.

Resumen La criopreservación del semen de porcino es una técnica aún no consolidada debido a la alta sensibilidad del espermatozoide de esta especie al proceso de congelación y descongelación, aun así, el uso de semen criopreservado es altamente deseable para el intercambio genético y el mantenimiento de la bioseguridad. Esta revisión tiene por objeto poner de relieve algunos factores limitantes del proceso y señalar las importantes avances desarrollados en los últimos años, debido principalmente al mejoramiento de las técnicas existentes, entre ellas, la caracterización de las proteínas de la eyaculación, los ajustes de extracción del plasma seminal y el uso de adyuvantes en la producción de los diluyentes. Todas estas técnicas harán que la criopreservación del semen de porcino sea más aplicable en los próximos años, para ser finalmente una técnica de uso comercial.

Efeitos do trimetilaminoetano (TES) e ringer lactato em sêmen de macacos-aranha mantidos em cativeiro ( Ateles paniscus e A. marginatus) / Effects of TES and a ringer-lactato diluent in semen from captive spider monkeys (Ateles paniscus e A. marginatus)

The performances of the diluents TES and CEBRAN II were compared as cryopreservatives of semen from non human primates of the genus Ateles. The experiment was carried out using one Ateles marginatus and two Ateles paniscus specimens, males and adults, maintained in the same captivity conditions at the National Center of Primates (CENP-SVS/MS). The animals were subjected to clinical and andrological examinations - testicular biometry - before the semen collection by eletroejaculation. Evaluations of motility and forward movement in the fresh semen were made. Semen were made dilution was made with the diluents TES and CEBRAN II. The ejaculates were diluted with the diluents (2:1proportion), packed in 0.25mL plastic straws and cryopreserved in liquid nitrogen. After thawing, the packed ejaculates were appraised in thermo resistance test (TTR). The averages of volume and concentration were, respectively, 1.94mL (0.83) and 3,020,000 sptz/mL (275.97). The pH 8 and seminal coagulation were observed in all samples. The results suggest that the TES diluent presents better efficiency in the preservation of Ateles semen than CEBRAN II.

Efeito da concentração e temperatura de adição de trealose em diluentes para a congelação de sêmen ovino em palhetas / Effect of the concentration and addition temperature of trehalose in extenders on freezing ram semen in straws

A trealose é um dissacarídio com potencial emprego como crioprotetor quando adicionada aos meios para congelamento de sêmen ovino. Este experimento foi realizado para verificar os efeitos da temperatura de adição (30°C e 4°C) e da concentração de trealose (2 por cento, 4 por cento e 6 por cento) sobre o sêmen ovino congelado em palhetas, utilizando como base as formulações INRA e TRIS/FRUTOSE. Os efeitos estudados em ambos experimentos foram medidos através da avaliação da motilidade espermática (MOT) e da integridade de acrossomas (INTA) em diferentes momentos após o descongelamento (0h, 2h e 5h). Os presentes resultados não recomendam a inclusão da trealose visando incrementar a qualidade in vitro do sêmen ovino congelado em palhetas nas concentrações e diluentes testados, porém, sugerem maiores estudos quanto a sua toxidade e possíveis interações com outros constituintes dos diluentes já formulados para o congelamento de sêmen ovino.

This study was aimed to evaluate the possible effects of the addition of trehalose to extenders developed for freezing ram semen in straws. The effects of addition temperature (30°C and 4°C) and concentration of trehalose (2, 4 and 6 percent) on INRA and TRIS/FRUTOSE diluents was evaluated. Their effects were studied through motility rate and by acrosome integrity at different incubation times after thawing (0, 2 and 5h). The results do not recommend the inclusion of trehalose in these diluents. However, it would be interesting to learn more about toxicity and interactions between the components of the extenders and trehalose in ram sperm frozen in straws.